Lipo8000?轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)試(shi)劑(Lipo8000? Transfection Reagent)是碧云天最新研發的一種以(yi)納米材料(liao)為基礎的最便捷的高效細胞(bao)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)試(shi)劑,達(da)到(dao)甚至超過了國(guo)際主流轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)試(shi)劑的轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)效果(guo),并且轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)過程(cheng)無須任何孵育時間,實現了細胞(bao)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)的至簡操作。適用(yong)于把質粒、siRNA或其它形式的核(he)酸包括DNA、RNA、寡核(he)苷酸、以(yi)及(ji)核(he)酸蛋白(bai)復合物(wu)或帶負電荷的蛋白(bai)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)到(dao)真核(he)細胞(bao)中,也可以(yi)用(yong)于活體(ti)動物(wu)的核(he)酸轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)以(yi)及(ji)用(yong)于基因治療(liao)。
Lipo8000?轉染(ran)(ran)試劑的納米技術可保(bao)證(zheng)其瞬(shun)時轉染(ran)(ran)和(he)(he)穩定(ding)轉染(ran)(ran)時的可靠(kao)性和(he)(he)穩定(ding)性。
Lipo8000?轉染試劑(ji)使用特別便捷,無血清(qing)培養液和核酸及轉染試劑(ji)可(ke)以直接(jie)混勻,質粒轉染無需任何孵(fu)育(yu)時間,即(ji)可(ke)直接(jie)加入到細(xi)(xi)胞(bao)培養器(qi)皿內,實現了(le)細(xi)(xi)胞(bao)轉染的至簡(jian)操作。
Lipo8000?轉染(ran)(ran)(ran)試劑(ji)對(dui)于常見的(de)哺乳動(dong)物細(xi)(xi)(xi)胞(bao)具有非常高的(de)轉染(ran)(ran)(ran)效(xiao)率、重復性(xing)(xing)好、操(cao)作(zuo)簡單、通常觀察不到細(xi)(xi)(xi)胞(bao)毒性(xing)(xing),對(dui)于貼壁細(xi)(xi)(xi)胞(bao)和懸浮細(xi)(xi)(xi)胞(bao)都適用,特(te)別適用于難轉染(ran)(ran)(ran)的(de)貼壁細(xi)(xi)(xi)胞(bao)。Lipo8000?轉染(ran)(ran)(ran)試劑(ji)由于幾乎(hu)完全(quan)沒有細(xi)(xi)(xi)胞(bao)毒性(xing)(xing),從而在轉染(ran)(ran)(ran)后(hou)無需進行細(xi)(xi)(xi)胞(bao)培養液的(de)更(geng)換(huan),在轉染(ran)(ran)(ran)24-48小時后(hou)直(zhi)接收集細(xi)(xi)(xi)胞(bao)進行蛋(dan)白表達鑒(jian)定即可。
Lipo8000?轉(zhuan)染試劑經過對小鼠胚胎成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)NIH3T3、人胚胎腎細(xi)胞(bao)HEK293/HEK293T、宮頸癌細(xi)胞(bao)Hela、結(jie)腸癌細(xi)胞(bao)HCT116、肝細(xi)胞(bao)HepG2和肺(fei)癌細(xi)胞(bao)A549等多(duo)種細(xi)胞(bao)的測試,轉(zhuan)染效率和Thermo公司的Lipofectamine? 3000 Transfection Reagent、Promega公司的ViaFect? Transfection Reagent相當(dang),在一些細胞(bao)中(zhong)甚至比(bi)Lipofectamine? 3000和(he)ViaFect?的(de)轉(zhuan)染效率更(geng)高。貼(tie)壁細胞轉(zhuan)染試劑的(de)比較和(he)選(xuan)擇(ze)請參考:。
Lipo8000?轉(zhuan)染試劑不僅適用(yong)于質(zhi)(zhi)粒、siRNA等單一(yi)成分的(de)細胞轉(zhuan)染,也適合多個(ge)質(zhi)(zhi)粒或者質(zhi)(zhi)粒與(yu)siRNA等的(de)組合轉(zhuan)染。
Lipo8000?轉(zhuan)(zhuan)染試劑轉(zhuan)(zhuan)染過表(biao)達(da)質粒后(hou),通常(chang)24-48小(xiao)時后(hou)達(da)到較(jiao)高的(de)蛋白表(biao)達(da)水平,并(bing)且(qie)很多(duo)情況下(xia)蛋白表(biao)達(da)量在(zai)轉(zhuan)(zhuan)染后(hou)48小(xiao)時顯著高于(yu)轉(zhuan)(zhuan)染后(hou)24小(xiao)時;轉(zhuan)(zhuan)染siRNA通常(chang)3-5天后(hou)對(dui)于(yu)目(mu)的(de)基因(yin)的(de)下(xia)調水平會比較(jiao)理想(xiang)。
Lipo8000?轉(zhuan)染(ran)試劑(ji)轉(zhuan)染(ran)細胞時,不(bu)受培養(yang)液中的血清和(he)抗(kang)生(sheng)(sheng)素的影響,即可以(yi)在(zai)血清和(he)抗(kang)生(sheng)(sheng)素存在(zai)的情況下進行(xing)細胞轉(zhuan)染(ran)。
Lipo8000?轉(zhuan)染(ran)試(shi)劑的轉(zhuan)染(ran)效果(guo)可以(yi)通過轉(zhuan)染(ran)表達EGFP等熒光(guang)蛋白的質粒進(jin)行快速(su)鑒定(ding)。
Lipo8000?轉染試劑與(yu)Lipofectamine? 3000 Reagent轉染(ran)效(xiao)果(guo)比較請參考圖1-8。
每毫(hao)升本(ben)轉(zhuan)染(ran)試(shi)劑大約(yue)可以轉(zhuan)染(ran)10厘米培(pei)養皿40個(ge)(ge)(ge)(ge)、6厘米培(pei)養皿125個(ge)(ge)(ge)(ge)、6孔(kong)(kong)板(ban)(ban)250個(ge)(ge)(ge)(ge)孔(kong)(kong)、12孔(kong)(kong)板(ban)(ban)625個(ge)(ge)(ge)(ge)孔(kong)(kong)、24孔(kong)(kong)板(ban)(ban)1250個(ge)(ge)(ge)(ge)孔(kong)(kong)、48孔(kong)(kong)板(ban)(ban)2500個(ge)(ge)(ge)(ge)孔(kong)(kong)、96孔(kong)(kong)板(ban)(ban)6250個(ge)(ge)(ge)(ge)孔(kong)(kong)。
保存條件:
4℃保(bao)存(cun)。長期不使(shi)用可以-20℃保(bao)存(cun)。
注意事項:
使用高純度的DNA或RNA有助于(yu)獲得(de)較高的轉染效率。對于(yu)質(zhi)粒,可以使用碧(bi)云(yun)天生產的進行(xing)抽提,以(yi)保證可以(yi)獲得較高的轉染效率。
轉染前(qian)細胞必須處于良(liang)好(hao)的生長(chang)狀態。
需(xu)自(zi)備不(bu)含抗生素的無血清培(pei)養液、Opti-MEM?培養(yang)液或普(pu)通的(de)DMEM培養(yang)液。
Lipo8000?轉染試劑不能vortex或離心(xin),宜緩慢晃(huang)動混勻(yun)。
Lipo8000?轉(zhuan)染試劑(ji)使用后(hou)請立即蓋好(hao)蓋子,避免長(chang)時間暴露(lu)在空氣(qi)中,影響轉(zhuan)染效率。
本(ben)產(chan)品僅限于(yu)專(zhuan)業人員(yuan)的科(ke)學研究用,不得(de)用于(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷或(huo)治療,不得(de)用于(yu)食品或(huo)藥品,不得(de)存放于(yu)普通住宅(zhai)內。
為了(le)您(nin)的安全(quan)和健康,請穿實驗服并戴一次性(xing)手套操作。