細(xi)(xi)胞(bao)(bao)遷(qian)移(yi)是(shi)指細(xi)(xi)胞(bao)(bao)在接收到內源或(huo)外源遷(qian)移(yi)信號后而產生的移(yi)動(dong)。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)遷(qian)移(yi)是(shi)通(tong)過胞(bao)(bao)體形變進(jin)行的緩慢的定(ding)向移(yi)動(dong)，涉及細(xi)(xi)胞(bao)(bao)覓食、傷口痊愈、胚胎發生、免(mian)疫反應(ying)、感染(ran)和癌癥(zheng)轉(zhuan)移(yi)等(deng)生理現象。因此(ci)通(tong)過對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)遷(qian)移(yi)的研究，對(dui)阻止癌癥(zheng)轉(zhuan)移(yi)、異體植皮等(deng)醫(yi)學(xue)應(ying)用方面具有一定(ding)意(yi)義。
細(xi)胞(bao)侵(qin)襲實驗(yan)則是研(yan)究腫瘤細(xi)胞(bao)對基(ji)(ji)質膜(mo)消(xiao)化后(hou)的遷移運動，腫瘤細(xi)胞(bao)須經血管(guan)基(ji)(ji)底(di)膜(mo)穿入深(shen)面間(jian)質后(hou)才能(neng)侵(qin)襲組織和(he)轉移至遠處。
腫瘤細胞侵襲遷移能力的改變通(tong)(tong)常(chang)采用(yong)Transwell小室(shi)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)。Transwell小室(shi)是(shi)(shi)(shi)一種膜濾器，也認為(wei)是(shi)(shi)(shi)一種有(you)通(tong)(tong)透性的支架(Permeable Supports)。這層(ceng)膜帶有(you)微孔，孔徑(jing)大小0.1-12.0μm，根據(ju)不(bu)同需要(yao)可用(yong)不(bu)同材(cai)料，一般常(chang)用(yong)的是(shi)(shi)(shi)聚碳酸酯膜。
將Transwell小室放(fang)入培(pei)養(yang)板中，小室內稱(cheng)上(shang)(shang)室，培(pei)養(yang)板內稱(cheng)下(xia)室，上(shang)(shang)室內盛(sheng)裝(zhuang)上(shang)(shang)層(ceng)培(pei)養(yang)液(ye)(ye)，下(xia)室內盛(sheng)裝(zhuang)下(xia)層(ceng)培(pei)養(yang)液(ye)(ye)，上(shang)(shang)下(xia)層(ceng)培(pei)養(yang)液(ye)(ye)以(yi)聚碳酸(suan)酯膜相(xiang)隔。將細胞種在上(shang)(shang)室內，由于聚碳酸(suan)酯膜有通透(tou)性，下(xia)層(ceng)培(pei)養(yang)液(ye)(ye)中的(de)成分可用影像(xiang)到上(shang)(shang)室內的(de)細胞，從而可以(yi)研究下(xia)層(ceng)培(pei)養(yang)液(ye)(ye)中的(de)成分對細胞生長、運動(dong)等(deng)的(de)影響(xiang)。
技(ji)術應(ying)用(yong)
應(ying)用(yong)(yong)包括(kuo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)遷移、趨化(hua)(趨化(hua)因子對細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的定向誘導(dao))，侵(qin)襲(癌細(xi)(xi)胞(bao)(bao)侵(qin)襲上(shang)指腫(zhong)瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)向局部侵(qin)犯或遠處轉移)，共(gong)培養(同一培養體系里，兩種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)非接觸(chu)性培養)。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)遷移侵(qin)襲上(shang)涉及(ji)多個步驟、高度完整的過程，在(zai)癌癥轉移、動脈粥(zhou)樣硬化(hua)和關節炎(yan)等(deng)疾(ji)病惡化(hua)中起重要作用(yong)(yong)。
服務流程(cheng)
1、客戶提供細胞實驗分組情況及實驗資料；
2、客戶提供檢測細胞。
3、客戶提供干預藥物。
4、客戶也(ye)可提(ti)供細胞；
孔板選擇
根據 transwell 板的(de)不同，transwell 小(xiao)室(shi)(shi)(shi)可以分(fen)為 6 孔板小(xiao)室(shi)(shi)(shi)、12 孔板小(xiao)室(shi)(shi)(shi)和 24 孔板小(xiao)室(shi)(shi)(shi)以及(ji)和 transwell 皿配套的(de) 75 mm 直徑(jing)的(de)小(xiao)室(shi)(shi)(shi)；根據孔徑(jing)的(de)不同，從小(xiao)孔徑(jing)到大(da)孔徑(jing)又分(fen)為 0.4μm 規(gui)格、3μm 規(gui)格、5μm 規(gui)格、8μm 規(gui)格，不同實驗(yan)對(dui)小(xiao)室(shi)(shi)(shi)孔徑(jing)的(de)要求也不一樣。
小(xiao)于(yu) 3μm 孔(kong)徑的小(xiao)室，細(xi)胞不(bu)會(hui)遷移(yi)通過，研(yan)究(jiu)不(bu)涉(she)及(ji)細(xi)胞運(yun)動能力，不(bu)需要細(xi)胞穿過聚(ju)碳(tan)酸酯(zhi)膜，應(ying)該選擇 3μm 以(yi)下的孔(kong)徑。例如共培養(yang)實驗和 caco-2 細(xi)胞轉運(yun)模型實驗。
共培(pei)養(yang)實(shi)驗
常用(yong) 0.4、34μm，將細(xi)胞(bao)(bao) A 種于上室，細(xi)胞(bao)(bao) B 種于下室，可以研究細(xi)胞(bao)(bao) B 分(fen)泌(mi)或代謝產(chan)生的(de)物(wu)質對細(xi)胞(bao)(bao) A 的(de)影響。
細胞遷(qian)移的實(shi)驗
要用 5.0、8.0、12.0μm 的(de)小室(shi)(shi)(shi)，這樣(yang)上室(shi)(shi)(shi)細(xi)胞(bao)可穿過聚(ju)碳酸酯(zhi)膜進入下室(shi)(shi)(shi)，計數進入下室(shi)(shi)(shi)的(de)細(xi)胞(bao)量可反映細(xi)胞(bao)的(de)趨化能(neng)力、遷移能(neng)力和侵(qin)襲能(neng)力。
趨化性實(shi)驗
細(xi)(xi)胞(bao)(bao) B 對(dui)(dui)細(xi)(xi)胞(bao)(bao) A 的趨(qu)(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)作用，將細(xi)(xi)胞(bao)(bao) A 種(zhong)于上(shang)室(shi)，細(xi)(xi)胞(bao)(bao) B 種(zhong)于下(xia)室(shi)，可以(yi)研究細(xi)(xi)胞(bao)(bao) B 分泌(mi)或代謝(xie)產(chan)生的物質對(dui)(dui)細(xi)(xi)胞(bao)(bao) A 的趨(qu)(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)作用；趨(qu)(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子對(dui)(dui)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的趨(qu)(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)作用，將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)種(zhong)于上(shang)室(shi)，下(xia)室(shi)加(jia)入某種(zhong)趨(qu)(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子，可研究該趨(qu)(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子對(dui)(dui)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的趨(qu)(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)作用。
細胞遷移實驗
常用 8.0、12.0μm 膜，上(shang)室(shi)(shi)種細(xi)胞，下(xia)室(shi)(shi)加入 FBS 或某些特定(ding)的(de)趨化因子，細(xi)胞會向營(ying)養成分高的(de)下(xia)室(shi)(shi)跑(pao)，計數進入下(xia)室(shi)(shi)的(de)細(xi)胞量可(ke)反映細(xi)胞的(de)遷移能力。
細(xi)胞(bao)侵襲實驗
常用(yong) 8.0、12.0μm 膜，原(yuan)理與細(xi)胞(bao)(bao)遷移實(shi)驗(yan)(yan)類(lei)似。上(shang)(shang)室(shi)種(zhong)細(xi)胞(bao)(bao)，下室(shi)加入(ru) FBS 或某些特定的(de)(de)(de)趨化因子，細(xi)胞(bao)(bao)會向營養(yang)成分高的(de)(de)(de)下室(shi)跑，但與細(xi)胞(bao)(bao)遷移實(shi)驗(yan)(yan)不同的(de)(de)(de)是(shi)，聚碳(tan)酸酯膜上(shang)(shang)室(shi)側鋪上(shang)(shang)一(yi)層(ceng)基質膠，用(yong)以模仿體內細(xi)胞(bao)(bao)外(wai)基質，細(xi)胞(bao)(bao)欲進(jin)入(ru)下室(shi)，先(xian)要分泌基質金(jin)屬蛋白酶（MMPs）將(jiang)基質膠降(jiang)解，方可通(tong)過(guo)聚碳(tan)酸酯膜。計數進(jin)入(ru)下室(shi)的(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)量可反映細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)侵(qin)襲能(neng)力。
